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APES图片的技术方法和心得体会
关键字:一张一张,头朝下,肉眼观无杂质
材料(全部是泡过酸的):100张白片(一面磨砂,一面光滑),APES原液2ml(北京中杉),丙酮1瓶,卧式染色缸3个,染色架4个,100%酒精1000ml,500ml烧杯3个,双蒸水若干,100ml量筒,移液器,计时器 步骤:
1.100张白片,一张一张的放入洗衣粉水里(或者是洗洁精水里),浸泡过夜;
2.浸泡过夜的白片,自来水洗,一张一张洗,用刷子,然后头朝下放在染色架上烤干;
3.烤干的白片,一张一张的放到酸缸里(一定注意不要把染色架放进去,除非是塑料架子),浸泡12h以上(视酸缸配制的时间长短调整,目的只要泡干净就行)
4.捞出片子,一张一张在流水下冲洗至少10遍,然后摆3个盛满双蒸水的500ml烧杯,依次经每一张片子,一张一张的洗三遍(注意稍微震荡一下,以肉眼观看不到杂志为准),然后头朝下放在染色架上,烤干。注意从这个时候开始,只能用手基础片子的两个边缘。
5.双蒸水润洗过的烤干的片子,一张一张的放入100%酒精里,至少2h。
6.把片子从酒精里捞出(注意:这个时候要用镊子捞,不能用手),头朝下放在染色架上烤干。要么装盒备用,要么就进行下一步涂片工作。
7.移液器取2mlAPES原液至100ml量筒,加丙酮至100ml,混匀备用(我一般用保鲜膜封住量筒的口,然后颠倒几下就好了)
8.将洗干净的片子放入卧式染色缸(注意只能拿片子的磨砂部位,一般一缸是10个片子),然后就把配好的APES液倒入缸里,正好100ml,别的容器我没有试过的。计时25秒后,把缸里的APES液,倒入另一个染色缸。稍等片刻(我一般都是把另一个缸子装好的时间),然后倒入纯丙酮清洗,稍微震荡,一般时间是40秒。
依此类推,丙酮挥发很快,基本上等你全部涂完,就可以装盒备用了。
9.处理掉实验用品,清洗容器,擦洗试验台。
注意事项:
1.最后要洗净,否则就会出现楼主的那种白斑现象 2.APES液要4度保存 3.不可重复利用 4.小心不要进眼里。5.至少半年内片子有效。