9月份经验教训总结—李新乐由刀豆文库小编整理，希望给你工作、学习、生活带来方便，猜你可能喜欢“9月份工作总结张国强”。
9月份经验教训总结
生产部：李新乐
九月份在制备gp41项目的菌体时，蛋白表达时形成了包涵体。
在基因工程中，在某些生长条件下，大肠杆菌能积累某种特殊的生物大分子，它们致密地集聚在细胞内，或被膜包裹或形成无膜裸露结构，这种水不溶性的结构称为包涵体。包涵体的形成主要是因为在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠的辅助因子, 或环境不适, 无法形成正确的次级键等。
1、重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,无论是用原核表达体系或酵母表达体系甚至高等真核表达体系, 都可形成包涵体。事实上, 内源性的蛋白质, 如果表达水平过高, 也会聚集形成包涵体。因此, 包涵体形成的原因主要是高水平表达的结果, 即合成速度太快, 以至于没有足够的时间进行折叠, 二硫键不能正确的配对, 过多的蛋白间非特异性结合, 蛋白质无法达到足够的溶解度等。
2、重组蛋白在大肠杆菌中表达时, 缺乏一些蛋白折叠过程中所需要的酶和辅助因子, 如折叠酶和分子伴侣等, 是包涵体形成的又一原因。
高效表达的重组异源蛋白在大肠杆菌中形成包涵体的影响因素有很多, 其中温度就是一个很重要的因素，提高温度有利于包涵体的形成。较高的培养温度由于加快了蛋白质的合成速度, 增加了无活性蛋白质集聚物的形成速度和疏水作用, 因此促进了包涵体的形成。在制备gp41项目的菌体时，在37度条件下诱导时，形成大量包涵体，再改用16度过夜诱导后就得到了改善，形成可溶性表达。
