杞菊地黄丸定性检查及含量测定解读由刀豆文库小编整理，希望给你工作、学习、生活带来方便，猜你可能喜欢“定性测定的性能分析”。
杞菊地黄丸定性检查及含量测定
前言：实验依据：有熟地之腻补肾水,即有泽泻之宣泄肾浊以济之;有英肉之温涩肝经,即有丹皮之清泻肝以佐之;有山药收摄脾经,即有获菩之淡渗脾湿以和之。药止六味,而大开大合,三阴并治,询补方之正鹊也”。本方配伍具有“三补”、“三泻”的特点,但中熟地黄用量是山萸肉、山药两药之和,且三辛佣明显重于三泻。枸杞和菊花增加了清肝明目的效果。现对杞菊地黄丸中各味药材进行定性鉴别和含量测定。
关键词;杞菊地黄丸；定性鉴别；含量测定；
1.地黄(鲜跃全)
定性鉴别（TLC法）
实验仪器：超声发生器、研钵、烧杯、微量移液管、、吹风机、研钵、烧杯、硅胶G薄层板、实验材料：杞菊地黄丸 熟地黄 泽泻 茯苓 枸杞子 牡丹皮 山茱萸 山药细粉 菊花
实验试剂：乙酸乙酯、冰醋酸、10%硫酸、蒸馏水正丁醇、甲苯、冰醋酸、无水乙醇、10%硫酸、蒸馏水
试验方法
1.1供试品溶液的制备
1.1.1取杞菊地黄丸(浓缩丸)6g，研碎，加乙醇超声处理分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液。
1.1.2供试品溶液的制备
称取颗粒剂2.2 g，研磨成细粉，加甲醇40 ml，超声振荡30 min。过滤。滤液浓缩至干,加乙酸乙酯2 ml溶解,得供试液。1.2对照品的制备
另取毛蕊花糖苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
1.3对照药材的制备
称取熟地黄浸膏粉0.5 g，按照供试品溶液制备方法，制得熟地黄药材的对照液。
1.4阴性对照液的制备
按处方比例，取除去熟地黄以外的其余药材，同供试品溶液制备方法分别制成阴性对照液。称取泽泻0.75g、茯苓0.75g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度；取枸杞子0.5g、牡丹皮0.75g,山茱萸1g和菊花0.5g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度；合并以上两种浓缩液，加山药细粉1g；加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。1.5薄层色谱法
1.5.1照薄层色谱法《中国药典》(2010年版)附录YIB试验，吸取上述溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯—乙酸乙醋—冰醋酸((24 : 8 : 1)为展开剂展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
1.5.2薄层色谱照薄层色谱法《中国药典》(2010年版)附录YIB试验，吸取上述溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水-甲醇(6∶3∶3∶2)为展开剂展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，显相同颜色的斑点且阴性对照液色谱在该位置上不显斑点。
2.山药（周开放）
【性味与归经】味甘，性平。归脾、肺、肾经。【功能与主治】补脾养胃，生津益肺，补肾涩精。
实验材料：回流装置、冷凝装置、水浴锅、坩埚、烧杯、微量移液管、硅胶G薄层板、吹风机。
实验试剂：乙酸乙酯、甲醇、浓氨试液、无水乙醇、10％磷钼酸。试验方法
2.1供试品溶液的制备
取本品（杞菊地黄丸）粉末5g，加二氯甲烷30ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。2.2对照品的制备
另取山药对照药材5g，同法制成对照药材溶液。对照药材加二氯甲烷同法制成对照药材溶液。
2.3阴性对照液的制备
按处方比例，取除去山药以外的其余药材，同供试品溶液制备方法分别制成阴性对照液。
1.称取泽泻0.75g、茯苓0.75g和熟地黄2g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度；
2.取枸杞子0.5g、山茱萸1g、牡丹皮0.75g和菊花0.5g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度； 3.合并以上两种浓缩液;加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。2.5薄层色谱法试验
照薄层色谱法《中国药典》(2010年版)附录YIB试验，吸取上述溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(9：1：0.5)为展开剂展开，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点且阴性对照液色谱在该位置上不显斑点。
3.茯苓（刘保松）
实验器材：50ml圆底烧瓶，冷凝管，蒸发皿，水浴锅，过滤装置，硅胶G薄层板，紫外检测仪，吹风机
实验材料：茯苓对照药材、杞菊地黄丸
实验试剂：乙醚，甲醇，甲苯，乙酸乙酯，甲酸，2%香草醛硫酸溶液，乙醇。
3.1供试品溶液制备
取杞菊地黄丸浓缩丸6g，研碎，加乙醚50ml(量筒)，超声处理10分钟，滤过(滤纸，漏斗)，滤液蒸干(蒸发皿，水浴锅)，残渣加甲醇1ml使溶解(移液管)，作为供试品溶液。3.2对照品药材制备
取茯苓对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
3.3阴性对照溶液制备
按处方比例，取除去茯苓以外的其余药材，同供试品溶液制备方法制成缺茯苓阴性对照液。3.4薄层色谱法试验
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯一甲酸((20 ：5 ：0.5)为展开剂(移液管)，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液一乙醇(4：1)混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰(吹风机)。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。或者照薄层色谱法(中国药典20015年版中国药典)试验，吸取上述溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯一冰醋酸((24 : 8 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.泽泻（王金龙）
实验器材：氧化铝柱，水浴锅，蒸发皿，过滤装置，硅胶H薄层板，紫外检测仪，吹风机
实验材料：泽泻对照药材、杞菊地黄丸
实验试剂：乙酸乙酯，23-乙酰泽泻醇B对照品，环己烷，乙酸乙酯，5%硅钨酸乙醇。
4.1供试品溶液制备
取杞菊地黄丸浓缩丸6g，研碎，加乙酸乙酯20 m1(量筒)，超声处理30分钟，滤过(滤纸，漏斗)，滤液加于氧化铝柱(200-300目，5g，内径为l cm，干法装柱)上，用乙酸乙酯10ml洗脱(移液管)，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙酸乙酯l ml(移液管)使溶解，作为供试品溶液。4.2对照品药材制备
取泽泻对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
4.3对照品溶液制备
另取23-乙酰泽泻醇B对照品，加乙酸乙酯制成每1 ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。4.4阴性对照溶液制备
按处方比例，取除去泽泻以外的其余药材，同供试品溶液制备方法制成缺泽泻阴性对照液。称取泽泻0.75g、熟地黄2g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度；取枸杞子0.5g、山茱萸1g、牡丹皮0.75g和菊花0.5g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度；合并以上两种浓缩液，加山药细粉1g；加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。
4.5薄层色谱法试验
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶H薄层板上，以环己烷一乙酸乙酯(1 : 1）为展开剂(移液管)，展开，取出，晾干，喷以5%硅钨酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰(吹风机)。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。或者照薄层色谱法(中国药典20015年版中国药典)试验，吸取上述溶液各5uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯一乙酸乙酯一冰醋酸((24 : 8 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.丹皮（雷铭宇）
仪器：加热回流装置、薄层板、紫外光灯
材料：乙酸乙酯、蒸馏水、甲醇、牡丹皮对照药材、乙醚、丙酮、丹皮酚对照品、环己烷、盐酸、三氯化铁、乙醇 定性鉴别（TLC法）
5.1 供试品溶液的制备
取本品15g（天平），研碎，加水100ml，加热回流3 0分钟，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯50ml（50ml量筒）振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干（水浴锅），残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。5.2对照药材溶液提取
取牡丹皮对照药材1g（天平），研碎，加乙醚40ml，加热回流1 小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮lml（量筒）使溶解，作为供试品溶液。5.3对照品溶液的制备
取丹皮酚对照品，加丙酮制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。5.4阴性对照溶液的制备
取处方中除丹皮外的其余药味，称取泽泻0.75g、茯苓0.75g、熟地黄2g和山茱萸1g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度（水浴锅）；取枸杞子0.5g和菊花0.5g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度；合并以上两种浓缩液，加山药细粉1g；加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。5.5.1薄层条件
照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述三种溶液各
10ul分别点于同一硅胶G 薄层板上，使成条状，以环己烷-乙酸乙酯（3：1)为展开剂（层析缸），展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5 %三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的条斑。5.5.2薄层板
硅胶Ｇ薄层板20ｃｍ×20ｃｍ×0.4ｃｍ,105℃ ,活化30ｍｉｎ备用;展开剂:-环乙烷-乙酸已酯-冰醋酸(10∶1∶0.1);斑点观察:置紫外灯下(λ=254ｎｍ)检识定位 5.6丹皮酚的含量测定 5.6.1材料与方法
紫外分光光度计、型电热恒温鼓风干燥箱、紫外分析仪剂均为99.9%无水乙醇、水为二次蒸馏水 5.6.1.2材料
牡丹皮、丹皮酚对照品
5.6.1.3对照品标准溶液的制备
精确称取丹皮酚对照品0.005g置于 50ml烧杯中，以无水乙醇溶解’ 转至 100ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀，得到 50ug/ml 的丹皮酚对照品溶液
5.6.1.4结果与分析
5.6.1.4.1测定波长的选择
以无水乙醇为对照品，在274nm出测的最大波长 5.6.1.4.2线性关系考察
分别吸取对照品溶液0.5ml，1ml，1.5ml，2ml，2.5ml，3.0ml，3.5ml，4ml，置于25ml容量瓶中!，用无水乙醇稀释至刻度摇匀。以无水乙醇为空白溶液在 274nm 波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标样品浓度为横坐标绘制标准曲线。
5.6.1.4.3丹皮酚含量测定
准确称取牡丹皮粉末 3.000g（分析天平），置于50ml锥形瓶中，加入25ml无水乙醇，60度恒温水浴2h，趁热过滤，置于25ml容量瓶中用无水乙醇溶液定容，作为供试品溶液。量取5份0.1ml牡丹皮供试品溶液分别置于25ml容量瓶中。用无水乙醇定容至刻度，摇匀，以无水乙醇为空白对照，于274nm波长处测定吸光度，测量三次，取平均值。丹皮酚含量测定结果如下表。
吸光度
检出量ug/ml
平均检出量ug/ml 丹皮酚含量
6.菊花（邬学良）
定性鉴别（TLC法）
实验器材：水浴锅，超声提取仪，过滤装置，硅胶H薄层板,聚酰胺薄膜，紫外检测仪、锥形瓶、分析天平、回流装置、蒸发皿、5ml量瓶、25ml棕色量瓶 实验材料：菊花，绿原酸供试品、杞菊地黄丸
实验试剂：稀盐酸，乙酸乙酯，甲醇，乙醇，正丁醇，甲酸，冰醋酸、氯仿
实验方法
6.1供试品溶液制备方法
6.1.1取本品杞菊地黄丸（浓缩丸），研细(过一号筛)取约1g，精密称定（分析天平）,置锥形瓶中,精密加人50％甲醇50ml,称定重量,加热回流2小时,冷却,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取（10ml移液管）续滤液10ml,蒸干残渣加氯仿5ml,浸渍3分钟,弃去氯仿液,残渣挥去氯仿（水浴，蒸发皿）,加水适量使溶解,并转移5ml棕色量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得。6.2对照品溶液的制备
取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50％甲醇制成每1 ml含绿原酸35μg的溶液，即得(10℃以下保存)。6.3对照药材溶液制备
另取菊花对照药材粉末1g，同供试品溶液制法制成对照药材溶液。
6.4阴性对照溶液的制备
取处方中除菊花外的其余药味，按上述供试品溶液制备阴性对照溶液。称取泽泻0.75g、茯苓0.75g和熟地黄2g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度；取枸杞子0.5g、牡丹皮0.75g和山茱萸1g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度；合并以上两种浓缩液，加山药细粉1g；加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。6.5照薄层色谱法 6.5.1薄层板
薄层板：硅胶板H 乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1：15：1：1：2)的上层溶液，乙酸乙酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）的上层溶液，乙酸乙脂:甲酸:水:乙醇(1:1:1:0.2)上层液，乙酸乙酯-正丁醇-水（4:5:1）的上层溶液 6.5.2薄层板
聚酰胺薄膜板展开剂：36%乙酸吸取上述四种溶液各0.5～1μl，分别点于同一硅胶板上，用展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.山茱萸（陈明璐）
实验仪器：加热回流装置、高效液相色谱仪、渗漏装置、吹风机、十八烷基硅烷键合硅胶
实验材料：杞菊地黄丸、蒸馏水、乙酸乙酯、甲醇、山茱萸药材、熊果酸对照品、甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸、磷酸、莫诺苷、马钱苷 7.1.供试品溶液的制备
取本品15g，研碎，加水100ml，加热回流 30 分钟，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯 50ml 振摇提取，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇 lml 使溶解，作为供试品溶液。7.2对照药材溶液的制备
取山茱萸对照药材1g，加乙醚 40ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 lml 使溶解，作为对照药材溶液。7.3样品溶液的制备
另取熊果酸对照品，加乙酸乙酯制成每lml 含 lmg的溶液，作为对照品溶液
7.4阴性对照品溶液的制备
按处方比例和制法制备不含山茱萸的阴性样品，制成阴性样品溶液。称取泽泻0.75g、茯苓0.75g和熟地黄2g，30ml水加热回流提取1个小时，过滤，提取液浓缩至一定浓度；取枸杞子0.5g、牡丹皮0.75g和菊花0.5g，70%乙醇加热回流提取1个小时，过滤，浓缩成适当浓度；合并以上两种浓缩液，加山药细粉1g；加70%乙醇20 mL，加热回流提取1个小时，滤过，蒸干，加适量水溶解，分别用10ml乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为阴性对照溶液。7.5定性检测
照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取〔鉴别〕（5)项下的供试品溶液及上述对照药材溶液和对照品溶液各 5µl，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯乙酸乙酯-甲酸（15 : 2 : 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm)检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点。
8.4.2吸取上述三种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸（3：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。
参考文献：1.2015年《中国药典》第一部
2.中华民族民间医药 2015 年8 月第24 卷第16 期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2015，Vol.24，No.16 3.第41 卷第12 期2013 年6 月广州化工Guangzhou Chemical IndustryVol.41 No.12June.2013 4.[1]邓如伟,冉兰,李颖,张榕.杞菊地黄颗粒中六味药材的薄层色谱鉴别[J].华西药学杂志,2005,03:264-266.5.李永霞，靳湘，杜霞.高效液相色谱法测定杞菊地黄丸中绿原酸的含量[J].中国医院药学杂志.1549-1550.1.杞菊地黄丸中山药的测定 2.杞菊地黄丸中茯苓的测定 3.杞菊地黄丸中泽泻的测定 4.杞菊地黄丸中菊花的测定 5.杞菊地黄丸中枸杞的测定 6.杞菊地黄丸中丹皮的测定 7.杞菊地黄丸中山茱萸的测定
读书的好处
1、行万里路，读万卷书。
2、书山有路勤为径，学海无涯苦作舟。
3、读书破万卷，下笔如有神。
4、我所学到的任何有价值的知识都是由自学中得来的。——达尔文
5、少壮不努力，老大徒悲伤。
6、黑发不知勤学早，白首方悔读书迟。——颜真卿
7、宝剑锋从磨砺出，梅花香自苦寒来。
8、读书要三到：心到、眼到、口到
9、玉不琢、不成器，人不学、不知义。
10、一日无书，百事荒废。——陈寿
11、书是人类进步的阶梯。
12、一日不读口生，一日不写手生。
13、我扑在书上，就像饥饿的人扑在面包上。——高尔基
14、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游
15、读一本好书，就如同和一个高尚的人在交谈——歌德
16、读一切好书，就是和许多高尚的人谈话。——笛卡儿
17、学习永远不晚。——高尔基
18、少而好学，如日出之阳；壮而好学，如日中之光；志而好学，如炳烛之光。——刘向
19、学而不思则惘，思而不学则殆。——孔子
20、读书给人以快乐、给人以光彩、给人以才干。——培根
