金针菇中6种拟除虫菊酯类农药多残留的测定由刀豆文库小编整理，希望给你工作、学习、生活带来方便，猜你可能喜欢“拟除虫菊酯类农药残留”。
金针菇中6种拟除虫菊酯类农药多残留的测定
食用菌是一种营养丰富并兼有食疗价值的食品，近年来在饮食中占有越来越大的比例[1-4]。但是由于大量使用农药来防治食用菌上的病虫害以及使用有农药残留的农作物的秸秆、木材等来栽培食用菌，使食用菌子实体受到污染，给人类的健康带来危害[ 5-6 ]。因此，农药引起的食品安全问题，特别是食用菌中农残超标问题日益受到国内外重视。拟除虫菊酯类农药是高效广谱杀虫剂，可用于食用菌上虫害的防治[ 71 3 ]。金针菇[ F l ammu l i n avelutipes(Curt.:Fr.)Sing.]又名冬菇、朴菇等，菌盖滑嫩、菌柄细长脆嫩，形美，味鲜，是世界上著名的食药两用菌和观赏菌，具有较高的营养价值和药用价值[14-16]。
目前有关金针菇中拟除虫菊酯类农药残留分析方法的文献报道较少。本实验拟优化建立金针菇中联苯菊酯等6种拟除虫菊酯类农药的多残留分析方法，为食用菌中拟2012, 200 Vol.33, No.06 食品科学※分析检测除虫菊酯类农药残留的高效、快速检测提供技术参考。材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
金针菇安徽农业大学植保学院食用菌基地自种。乙腈、正己烷、乙酸乙酯、石油醚(均为分析纯)江苏强胜化工有限公司；无水硫酸钠、氯化钠(均为分析纯)中国医药集团上海化学试剂公司；弗罗里硅土(60～100 目)德
国 Riedel-de Haen 公司；实验用水均为艾科浦超纯水系统所制纯水。农药标准
品：联苯菊酯(bifenthrin，纯度≥ 98.3%)、甲氰菊酯(fenpropathrin，纯度≥ 99.0%)、氰戊菊酯(fenvalerate，纯度≥ 99.8%)、溴氰菊酯(deltamethrin，纯度≥ 98.5%)、高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin，纯度≥ 97.0%)国家农药质检中心；高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin，纯度≥ 99.0%)天津农药股份有限公司。
6890 气相色谱仪(带电子捕获检测器(ECD)美国安捷伦科技有限公司；KQ-600 型超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；ZD-2 型调速多用振荡器江苏省金坛市国胜实验仪器厂；TPZ-5 型多管架自动平衡离心机长沙湘仪离心机仪器有限公司；EYELAN-1100 型旋转蒸发仪上海爱郎仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标准溶液的配制
用万分之一天平准确称取农药标准品，配制成质量浓度为1000mg/L 的供试农药单标贮备液。分别移取联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯单标贮备液0.1mL，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯单标贮备液0.2mL置于10.0mL 容量瓶中，正己烷定容至刻度，得到拟除虫菊酯类农药混合标准贮备液(联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯质量浓度为10.0mg/L，氰戊菊酯、溴氰菊酯和高效氯氰菊酯质量浓度为20.0mg/L)，逐级稀释配制成不同供试浓度的混合标准工作溶液。
1.2.2 农药的添加
准确称取10.0g匀浆后的金针菇样品于50mL聚四氟乙烯离心管中混匀，加入混合标准工作溶液，使联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的添加量为
0.005、0.05、0.5mg/kg，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的添加量为0.01、0.1、1.0mg/kg，混匀静置。每种添加水平设置5 个重复，同时设置空白对照。
1.2.3 样品前处理
提取：在添加混合工作标准溶液的金针菇样品中加入5mL 水和20mL 乙腈；机械振荡提取10min，超声波振荡提取10min；加入6g 氯化钠，振摇1min，4000r/min 离心5min；取全部上清液过无水Na2SO4 漏斗；所剩基质再加入20mL 乙腈，超声波提取15min，离心，取全部上清液过无水Na2SO4漏斗；合并提取液于40℃下旋转浓缩近干，待净化。
净化：玻璃层析柱中自下而上依次装入少许脱脂棉、2cm 无水Na2SO4、4g 5% 的水脱活的弗罗里硅土和2cm 无水Na2SO4，敲实；淋洗液：石油醚-乙酸乙酯(98:2，V/V)；10mL 石油醚预淋洗，40mL淋洗液(5 ＋5 ＋ 10 ＋ 10 ＋ 10)分5 次淋洗，前10mL 弃去；收集淋洗液于38℃下浓缩至干，正己烷定溶至10mL，待气相色谱-电子捕获(gas chromatograph-electron capturedetector，GC-ECD)测定。
1.2.4 色谱条件
色谱柱：HP-5 毛细管气相色谱柱(30mm × 0.25mm，0.25μm)；升温程序：60℃保持1min，以30℃/min 升温到180℃，再以5℃/min 升温到到250℃，保持5min，最后以3℃/min 到280℃，保持1min；后进样口温度：250℃；检测器温度：300℃；载气：高纯氮气(99.999%)；流速：1.5mL/mi n ；不分流进样；进样体积：2μL。结果与分析
2.1 标准曲线的制备
按照1.2.4 节的色谱条件，分别测定不同质量浓度供试农药标准样品，获得一系列对应的峰面积值。以进样量/ng 为横坐标、峰面积/mAU 为纵坐标作图，绘制标准曲线并求出线性回归方程(表1)。结果显示，在0.005～0.50mg/L 范围内，联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的决定系数在0.99以上；在0.01～1.00mg/L 范围内，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的决定系数在0.99 以上。线性关系良好，检测灵敏度满足金针菇中拟除虫菊酯类农药残留检测限量标准的要求。标样图谱见图1。
表1 6 种拟除虫菊酯类农药标准曲线、线性范围及相关系数
表2 不同提取方法对金针菇中拟除虫菊酯类农药添加回收结果的影响 表3 淋洗剂用量对金针菇中拟除虫菊酯类农药添加回收结果的影响
2.2 提取方法的确立
在空白金针菇样品中添加供试农药，其中，联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的添加量为0.1mg/kg，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的添加量为0.2mg/kg的样品，以乙腈为提取溶剂，比较4 种不同提取方法对金针菇中供试农药添加回收率的影响。结果表明(表2)，采用机械振荡10min后再进行超声波振荡10min这种混合提取1 次的效果不好，供试农药添加回收率在70%左右；当提取次数为2 次时，金针菇中供试农药的添加回收率均可满足农药残留分析的要求，达72.56%～102.93%，变异系数为0.21%～4.20%。其中，以混合提取20min ＋超声波振荡15min 的提取方法效果最好，供试农药的添加1.联苯菊酯(0.1mg/kg)；2.甲氰菊酯(0.1mg/kg)；3.高效氯氟氰菊酯(0.1mg/kg)；4.高效氯氰菊酯(0.2mg/kg)；5.氰戊菊酯(0.2mg/kg)；6.溴氰菊酯(0.2mg/kg)。
图1 6 种拟虫菊酯类农药标样(A)、金针菇空白(B)和添加回收样品(C)色谱图
回收率为96.77%～102.93%，变异系数为0.98%～4.20%。因此，优化的提取方法为先用机械振荡和超声波振荡混合提取1 次后，再用超声波振荡15min。
2.3 净化方法的确立
提取液中通常含有许多极性和非极性杂质，会影响目标化合物的测定结果，所以要进一步净化样品才能在气相色谱上测定。由文献[17-19]可知，单一淋洗剂的效果较差，而拟除虫菊酯类农药是弱极性物质，且实验过程中为达到环保要求尽量避免使用毒性较大的有机溶剂，因此选用石油醚-乙酸乙酯(98:2，V/V)混合溶剂作为淋洗剂。在空白金针菇样品中添加供试农药，其中，联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的添加量为0.1mg/kg，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的添加量为0.2mg/kg 的样品，以乙腈为提取溶剂，按优化后的方法提取，采用弗罗里硅土柱层析净化，用40mL 淋洗剂分成5、5、10、10mL 和10mL 收集，获得5 个淋洗液流分，比较不同流份中供试农药的回收率。结果表明(表3)，联苯菊酯等6 种拟除虫菊酯类农药在前10mL 淋出液中未检出，第3～5个流份中回收率之和达8 9% 以上。因此，在优化的净化方法中，确定石油醚-乙酸乙酯(98:2，V/V)混合溶剂作为淋洗剂，用量为40mL，前10mL 淋出液弃去，收集后30mL。
2.4 添加回收实验多残留分析方法。样品以乙腈为提取剂，超声波和机械振荡混合提取，弗罗里硅土柱层析净化，石油醚-乙酸乙酯(98:2，V/V)淋洗，GC-ECD 测定。在添加量范围内，供试农药平均添加回收率为85.54%～102.27%，变异系数为1.24%～9.58%。联苯菊酯、甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的最低检测
限为5μg/L，高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的最低检测限为1 0μg /L。因此，该方法可以很好地满足金针菇中联苯菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯等拟除虫菊酯类农药残留同时检测的要求。
