提质粒_大提质粒

其他范文 时间:2020-02-28 06:07:06 收藏本文下载本文
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大肠杆菌质粒的提取

1、离心收集3ml菌体;

2、200µl溶液I悬浮菌体;

3、400µl溶液II立即混合均匀;

4、300µl溶液III混合均匀;

5、最大转速离心10分钟;

6、上清液加入1倍体积的异丙醇,沉淀2分钟,离心10分钟;

7、用70%乙醇洗涤2次;

8、干燥后加一定量的TE缓冲液溶解。

溶液I:50nM葡萄糖,25mMTris-HCl,10Mm EDTA,Ph8.0.溶液II:0.2M NaOH,1%SDS.溶液III:2.55M乙酸钾,pH4.8.

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