分子生物学思考题由刀豆文库小编整理,希望给你工作、学习、生活带来方便,猜你可能喜欢“分子生物学思考题答案”。
思考题
1.基因诊断:利用分子生物学技术,检测基因结构(DNA)及其表达(RNA)是否正常,从而对疾病作出诊断的方法。
RFLP:若突变(多为中性突变)导致某一限制性核酸内切酶识别位点改变(获得或丢失 ——遗传标记),经酶切后,出现DNA片段长度的差异,在人群中形成两种或两种以上的限制性类型,并按孟德尔规律遗传,称为限制性片段长度多态性。
微卫星: 以 2~6 bp的核心序列为单位,彼此连接、重复排列的DNA串联重复序列,也称短串联重复序列。
等位基因特异寡核苷酸探针杂交法 原理
① 设计和制备涵盖突变位点的一对正
常寡核苷酸探针(无突变序列)和突变寡核苷酸探针;
② 病人的DNA样品一分为二,分别吸
附于杂交膜上;
③ 利用正常探针和突变探针分别进行
探针杂交; ④ 作出诊断。
DNA突变对酶切位点的影响,若突变位点发生在限制性识别位点内,可丧失相应的酶切位点。若突变位点发生在限制性识别位点外,可产生新的酶切位点。原理:基因突变—限制性内切酶识别位点改变(丧失或增加)—经限制性内切酶酶切—限制性片段长度或数量改变—Southen印迹—探针杂交显示—分析诊断。
若致病基因与同一条染色体上的某一RFLP存在连锁关系,则可从RFLP家谱分析中间
接推知致病基因的存在。连锁关系:
① RFLP 主要存在于某一致病基因的染色体上,正常基因时则极少出现
② RFLP 主要存在于某一正常基因的染色体上,基因异常时则极少出现
1.针对性强:检测对象是病变的基因、异常表达的基因或病原体基因,属于病因诊断或发病原因分析。
2.特异性高:所用的分子生物学技术能特异的检出致病基因。如分子杂交技术采用特异序列探针,PCR采用特异序列引物,通过互补识别致病基因。
3.灵敏度高:只需极微量的标本,就能做出分析诊断。
① 分子杂交技术采用放射性同位素、酶或化学发光试剂标记探针,有很高的放大灵敏度;
② PCR 扩增技术采用循环扩增至百万倍再分析致病基因,因而灵敏度更高。
4.易获得稳定的结果:核酸特别是DNA比蛋白质稳定,并且对核酸标本要求不高 5.可快速、早期诊断疾病:疾病的发生几乎都离不开自身基因结构或功能的异常,而基因诊断技术常只需数小时即可在基因水平上做出判断。
6.适应范围广:可对遗传病、感染性疾病作出诊断,也可作癌症的基因检查分析,以及在法医学上进行个体识别、亲子鉴定等。